細(xì)胞計數(shù)儀讓細(xì)胞計數(shù)從此不再繁重
發(fā)布日期:2018-10-30 瀏覽次數(shù):922
細(xì)胞計數(shù)儀讓細(xì)胞計數(shù)從此不再繁重
“為了保證后續(xù)實驗的細(xì)胞品質(zhì),許多實驗室會對細(xì)胞的濃度和活率進(jìn)行檢測,傳統(tǒng)的方法是通過針對哺乳動物細(xì)胞的臺盼藍(lán)染料,針對酵母的美蘭染料。兩種染料都是染色細(xì)胞核的,當(dāng)細(xì)胞存活時,膜具有選擇透過性,染料無法進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。當(dāng)細(xì)胞死亡后,膜的選擇透過性失去,染料便可以進(jìn)入細(xì)胞核將細(xì)胞染色。從而區(qū)分出細(xì)胞的死活。傳統(tǒng)的血球計數(shù)板操作復(fù)雜,誤差大已經(jīng)越來越多的被自動化的細(xì)胞計數(shù)儀所取代。細(xì)胞計數(shù)儀,具有多方面的特性,這項特性保證了計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。”
極其便捷的操作
細(xì)胞計數(shù)儀操作機(jī)器方便,只需要簡單的三步就可以完成細(xì)胞濃度活率測定。
您只需要上樣20微升,將計數(shù)板插入儀器,點擊開始20秒以內(nèi)就可以得到細(xì)胞的濃度和活率
不需要人工調(diào)焦
基于圖像分析的計數(shù)儀都需要在正確的焦距下得到清晰的細(xì)胞圖像,進(jìn)而進(jìn)行圖像分析得到計數(shù)結(jié)果。如果焦距調(diào)整的不正確,將會嚴(yán)重的影響濃度及死活判斷。下圖就是一些列焦距錯誤的圖片,如果焦距調(diào)整不當(dāng),會嚴(yán)重的影響死活的判斷,影響計數(shù)結(jié)果的穩(wěn)定性。細(xì)胞計數(shù)儀在使用過程中都無需進(jìn)行人工調(diào)焦,極大程度的避免了焦距誤差對于死活判定的影響。
良好的景深性能
當(dāng)鏡頭對著某一物體聚焦清晰時,在鏡頭中心所對的位置垂直鏡頭軸線的同一平面的點都可以在膠片或者接收器上相當(dāng)清晰的圖像,在這個平面沿著鏡頭軸線的前面和后面一定范圍的點也可以結(jié)成眼睛可以接受的較清晰的像點,把這個平面的前面和后面的所有景物的距離叫做相機(jī)的景深。
對于細(xì)胞計數(shù)儀景深的意義在于可以可以在CCD上清晰成像的細(xì)胞懸液的深度。一般的計數(shù)板都有100-200微米的深度,如果鏡頭的景深性能不佳時,會使一些在景深范圍以內(nèi)的細(xì)胞無法成像。理想的計數(shù)儀應(yīng)當(dāng)是可以將整個計數(shù)板深度的內(nèi)的細(xì)胞都清晰成像。景深受鏡頭焦距,物距,光圈大小CCD大小的影響。細(xì)胞計數(shù)儀權(quán)衡各個因素,設(shè)計出大景深的成像系統(tǒng),保證計數(shù)板內(nèi)的細(xì)胞都可以清晰呈像,保證計數(shù)結(jié)果的穩(wěn)定性與準(zhǔn)確性。
多視野檢測
將一定體積的細(xì)胞懸液加入恒定的空間內(nèi)時,伴隨恒定空間內(nèi)液體流速的差異,表現(xiàn)為細(xì)胞的分布密度會有輕微的差異,這個現(xiàn)象是無法*避免的。在細(xì)胞計數(shù)之初,人們就考慮到了這個問題,標(biāo)準(zhǔn)的血球計數(shù)板操作需要統(tǒng)計4個角的細(xì)胞濃度然后求平均值。全系列細(xì)胞計數(shù)儀,在大視野大統(tǒng)計量的基礎(chǔ)上又引入了多視野檢測,可以對于一個樣品檢測多個視野,軟件自動求平均。在下圖中上方live 3平均值,一共統(tǒng)計了3個不同的視野,然后自動計算平均值,可以看到下方三個視野的值高度接近,進(jìn)一步求平均可以*抵消細(xì)胞分布不均引起的誤差。
完善的雜質(zhì)過濾功能
細(xì)胞計數(shù)儀可以有效區(qū)分細(xì)胞碎片及背景雜質(zhì),排除細(xì)胞碎片,背景雜質(zhì)對于計數(shù)結(jié)果的影響。如下圖所示,細(xì)胞計數(shù)結(jié)果中細(xì)胞碎片和背景雜質(zhì)被自動去除。
在進(jìn)行原代培養(yǎng),或者細(xì)胞消化不*是常常會產(chǎn)生細(xì)胞團(tuán)塊。使用血球計數(shù)板計數(shù)時,標(biāo)準(zhǔn)的操作要求將一個團(tuán)塊技術(shù)為一個細(xì)胞,但是這并不能表示細(xì)胞懸液的真實濃度。細(xì)胞計數(shù)儀的分析軟件,具有先進(jìn)的算法,可以將團(tuán)塊中的細(xì)胞分辨出來,更加真實的反應(yīng)您細(xì)胞的濃度與活率。